Notice
Electrophorèse sur gel de polyacrylamide en conditions dénaturantes (SDS) pour l'identification des crevettes et crabes crus et cuits
The use of sodium dodecyl sulphate polyacryalamide gel electrophoresis for the identification of raw and cooked Shrimps and Crabs
Civera T., Parasi E.
Italian Journal of Food Science, 1991, n° 2 - Texte en Anglais
Analyse
L'efficacité, la fiabilité et les limites d'utilisation de la technique d'électrophorèse sur gel de polyacrylamide en conditions dénaturantes couplée à une coloration des protéines au bleu G 250 sont évaluées, pour l'identification d'espèces de crustacés crus et cuits.
Des échantillons frais et congelés de crevettes grises et roses, crabes et langoustines sont soumis à des traitements thermiques. Des couples (temps, température) de 10 à 60 minutes et 60 à 121°C sont appliqués.
A partir de 2 à 4 grammes de muscle une extraction dans un tampon (Tris, SDS, Mercaptoethanol) est réalisée; les protéines solubles sont séparées par électrophorèse SDS PAGE (stack 3.1%-résolution 10.4%).
* Comparaison d'espèces à partir d'extrait de muscle cru :
Chaque profil électrophorétique peut être divisé en trois groupes de poids moléculaire : partie A du gel de 78 KD à 45 KD, partie B de 45 à 30 KD, partie C de 30 à 12 KD. Toutes les espèces montrent un profil électrophorétique caractéristique, les différences majeures se situant dans la partie C du gel.
* Etude des effets des traitements thermiques à partir de langoustines (norway lobster):
Tous les échantillons soumis à des traitements thermiques différents ont un profil électrophorétique identique et seul le traitement prolongé à 100°c pendant 45 minutes provoque une réduction du nombre et de l'intensité des bandes protéiques.
* Comparaison de deux espèces proches de crevettes : Giant river shrimp et Giant tiger shrimp.
La distinction entre les deux espèces est encore possible même après traitement thermique à 100°C pendant une heure.
* Effet des traitements thermiques sur une espèce de crabe : spinous crabe (Brachyura).
Les profils électrophorétiques sont identiques pour les échantillons crus et cuits (60 à100°C,10 à 30 minutes) ; pour ce crabe il est important de noter les différences existantes dans le profil d'électrophorèse pour des fractions protéiques issues de muscle différents (pince, abdomen).
L'utilisation de SDS PAGE pour l'identification d'espèces de crustacés crus et cuits se révèle fiable,ceci pour les espèces étudiées et dans les conditions mentionnées par les auteurs .De plus cette étude confirme la haute sensibilité de coloration du bleu G250 en comparaison avec la méthode classique associant bleu de coomassie et solvants organiques en solution. En ce qui concerne l'identification proprement dite, la fraction protéique principale se situe en bas du gel d'électrophorèse (poids moléculaire de 30 à 12 KD) même s'il est nécessaire d'étendre l'observation à la zone médiane du gel (PM jusqu'à 66 KD). Cette méthode se révèle être utilisable pour la différentiation mais aussi pour l'identification d'espèces dans les produits soumis à des traitements thermiques exception faites des produits stérilisés.
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